定量PCR檢測試劑盒可避免假陰性的出現
瀏覽次數:556發布日期:2021-01-18
定量PCR檢測試劑盒采用熒光PCR方法,可對拭子樣本中的病毒核酸片段進行定量檢測,可用于臨床對病毒的輔助診斷。簡單地說,PCR是一種熱循環的方法,用來制造一個特定DNA樣本的數十億個拷貝,使其足夠大,以供研究。PCR是一種*的技術,具有廣泛的應用,包括生物醫學研究和刑事取征。
沒錯,這就是RT-PCR技術和實時熒光定量PCR技術結合在了一起。實時定量中,RNA鏈也是首先通過逆轉錄過程,形成與其互補的DNA鏈,再以此DNA鏈作為模板進行實時熒光定量PCR反應,完成DNA的擴增。此技術在目的RNA段的檢測之中被廣泛應用。
病毒保守基因片段設計特異性引物及熒光探針,該探針能與引物擴增區域中間的一段核酸序列發生特異性結合。
在PCR延伸反應中,酶的外切活性將5’端熒光基團從探針上切割下來,使之游離于反應體系中,從而脫離了3’端熒光淬滅基團的屏蔽,分離后的熒光基團在機器特定光源的激發下產生熒光,再由儀器的檢測單元進行檢測,從而實現對FCV的特異性檢測。
定量PCR檢測試劑盒使用內質控體系,能夠實時監測整個檢測過程,有效防止假陰性結果的產生。其主要優點包括:
1.基線噪音小,陽性信號明顯,非常容易判斷陰陽性;
2.靈敏度高,能夠檢測出感染早期的弱陽性樣本;
3.設置有內標,可以監控從提取到RCR檢測的全過程,可及時排除假陰性結果;
4.反應性好,可檢出不同基因型的病毒和基因變異的病毒。
定量PCR檢測試劑盒也是目前*在試劑盒中加入內標控制的多重熒光PCR試劑盒,對樣本取樣及PCR反應過程全面質控,確保檢測結果準確可靠,該試劑靈敏度、特異性高,與其他病毒無交叉反應。